Non-Lethal Blood Sampling of Fish in the lab and Field With Methods for Dried Blood Plasma Spot Omic Analyses
Notice bibliographique
Résumé
There is global acknowledgment that humane methods in animal research are a priority, but few environmental effects monitoring programs use nonlethal methods for fish. The goal of the present study was to determine the impacts of sampling small volumes of blood in larger-bodied fish on survival and healing. In addition to evaluating survival following blood sampling, we evaluated the utility of dried blood spots as an alternative for sample processing and storage in the field. In our approach, we housed 80 rainbow trout ( Oncorhynchus mykiss ) in our flow-through aquatic facility. We then anaesthetized using MS-222 and sampled 1 μl/g bw of blood via puncture of the caudal vasculature. We tested four different post-blood sampling treatments on the puncture wound: 1. application of liquid bandage; 2. a swab of betadine; 3. a swab of fish mucous; and 4. compared survival outcomes to a group where no post-treatment was performed (negative control). Overall, we observed 90% survival among all treatments, with the most effective approach being the negative control (100% survival). Based upon these results, we repeated the blood sampling with no-post treatment by housing 20 rainbow trout (not previously tested upon) in cages at a nearby creek and monitored survival for 2 weeks post sampling. The survival rate was 95% with full healing of the puncture site in all subjects. In addition to this, we tested the efficacy of dry blood spotting on proteomic, lipidomic and amino acid analysis as an alternative method for blood sample processing and storage. It was found that dried plasma spotting using parafilm in conjunction with a modified Bligh-Dyer extraction offered the best balance for good recovery of protein, lipid and amino acids relative to wet plasma and Noviplex dried plasma spot cards. In this article, we will present the detailed results of these combined studies and describe what we have determined to be the safest non-lethal blood sampling protocol.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,002 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,005 | 0,003 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».