Generation of apical-out airway organoids from human primary airway epithelial cells
Notice bibliographique
Résumé
Airway organoids can be successfully generated from primary airway epithelial cells, recapitulating the architecture, polar organization, and key functions of the in vivo tissue. However, the closed organoid structure limits the accessibility to the luminal apical cell surface, which is exposed to the environment in vivo. This inaccessibility hinders the utilization of airway organoids in assays examining host-pathogen interactions and responses to environmental stimuli, both of which occur primarily at the apical surface. To address this limitation, we have developed PneumaCult™ Apical-Out Airway Organoid (AOAO) Medium, which supports the fast and efficient generation of airway organoids exposing their apical side to the environment in the absence of an extracellular matrix hydrogel. To generate AOAOs, two-dimensional expanded human bronchial epithelial cells (HBECs) were seeded in PneumaCult™ AOAO Medium in micropatterned [AggreWell™400] plates to promote cell aggregation. The aggregates were then transferred to suspension culture in fresh PneumaCult™ AOAO, and incubated at 37°C until they differentiated into AOAOs. These organoids can be generated from HBECs from a multitude of different passages and display high culture homogeneity, with low inter-donor size variability (average diameter 74 ± 4 μm at p3, n=3). The organoids are mainly composed of ciliated cells (61 ± 16% of all cells at p3) that display outward-facing, beating cilia and KRT5-positive basal cells (n=3). The easy access to the apical surface of the epithelium and scalability of this culture system offer a powerful in vitro model suitable for studying host-pathogen interactions and high-throughput antiviral drug screening.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,002 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».