MétaCan
Menu
← Retour à la cohorte
Enregistrement W4230753252 · doi:10.24124/2013/bpgub925

Characterizing the CRD-BP-RNA interaction in-vitro and in cells.

2013· dissertation· en· W4230753252 sur OpenAlexaff
Mark Barnes

Notice bibliographique

Revuenon disponible
Typedissertation
Langueen
DomaineBiochemistry, Genetics and Molecular Biology
ThématiqueRNA Research and Splicing
Établissements canadiensCanadian HeritageUniversity of Northern British ColumbiaLibrary and Archives Canada
Organismes subventionnairesnon disponible
Mots-clésRNA recognition motifRNARNA-binding proteinBiologyCell biologyIn vitroBinding siteMessenger RNAMutantMolecular biologyGeneChemistryGenetics

Résumé

récupéré en direct d'OpenAlex

The highly conserved family of RNA-binding proteins known as the VICKZ RNA-binding proteins play an integral role in the formation of cytoplasmic RNPs which leads to the stabilization, localization and translational control of many mRNA transcripts in the cell. The key investigation of this thesis was to analyse the binding ability of the VICKZ protein family member, the coding region determinant-binding protein (CRD-BP), both in-vitro and in cells. CRD-BP has four K-homology (KH) domains and two RNA-recognition motif (RRM) domains. Deletion studies in CRD-BP orthologs have shown that the KH domains, and not the RRM domains, are predominantly responsible for binding to RNA substrates. However, it is still unclear to what extent each of the KH domains play in their physical interaction with RNA molecules, nor is it known if each of the KH domains an play equal role in interacting with different RNA substrates. In an effort to address the above questions, we used site-directed mutagenesis to mutate the first glycine of the G-X-X-G motif in each KH domain separately, and in combinations. We mutated the glycine to an aspartate to introduce both physical and electrostatic hindrance for binding at the G-X-X-G motif. The goal was to determine if such a mutation can disrupt CRD-BP's ability to bind its RNA substrates both in-vitro and in cells. Our results showed that KG single mutants KH2, KH3 and KH4 did not disrupt the CRD-BP-c-myc CRD RNA interaction in-vitro. CRD-BP KH1 single mutant exhibited a modest reduction in binding to the c-myc CRD RNA substrate in-vitro. However, double KH domain mutations (KH1-2, KH1-3, and KH2-4) resulted in a complete abrogation of CRD-BP's ability to bind the c-myc CRD RNA substrate, suggesting these KH domains work in tandem to bind to the c-myc CRD RNA substrate in-vitro. Interestingly, the CRD-BP KH domain double mutant, KH3-4, showed only a modest reduction in the c-myc CRD RNA substrate binding, suggesting that the first glycine in the G-X-X-G motif of KH3 and KH4 doe

Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.

Comment cette classification a été obtenuedéplier

Prédiction machine sur la base complète

Imitation des enseignants

Ni prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.

score de la tête « metaresearch » (Codex)0,000
score de la tête « metaresearch » (Gemma)0,000
Version: metacan-v3-hybrid-931329e0061cStatut de validation: machine_predicted_unvalidated
Catégories candidatesaucune
Catégories consensuellesaucune
DomaineSignal candidat: aucune · Signal consensuel: aucune
Devis d'étudeSignal candidat: Expérimental (laboratoire) · Signal consensuel: Expérimental (laboratoire)
GenreSignal candidat: Empirique · Signal consensuel: Empirique
Score de désaccord entre enseignants0,002
Score d'incertitude au seuil0,005

Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)

CatégorieCodexGemma
Métarecherche0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens strict)0,0000,000
Méta-épidémiologie (sens large)0,0000,000
Bibliométrie0,0000,000
Études des sciences et des technologies0,0000,000
Communication savante0,0010,000
Science ouverte0,0000,000
Intégrité de la recherche0,0000,001
Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger)0,0020,001

Scores machine (provisoires)

Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.

Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.

Tête enseignante Opus0,009
Tête enseignante GPT0,279
Écart entre enseignants0,269 · la distance entre les deux têtes enseignantes sur ce seul travail
Statut de validationscore_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle

Classification

machine, non validée

Prédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.

Les modèles n’ont appliqué aucune catégorie : rien dans la taxonomie ne correspondait à ce travail.
Devis d'étudeExpérimental (laboratoire)
Domainenon disponible
GenreEmpirique

Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».

En bref

Citations1
Publié2013
Routes d'admission1
Résumé présentoui

Explorer davantage

Même sujetRNA Research and Splicing→Travaux en français237 207→