Identification and Nuclear Localization of a Novel Prolactin and Cytokine-Responsive Carboxypeptidase D
Notice bibliographique
Résumé
A full-length, PRL-inducible complementary DNA (cDNA) encoding a novel, nuclear-targeted carboxypeptidase D isoform (designated CPD-N) was identified in the rat PRL-dependent Nb2-11C and PRLindependent Nb2-Sp lymphoma cell lines by differential display.The CPD-N cDNA (3751 bp) has 99% (3582/3583) homology with rat carboxypeptidase D (CPD; 4377 bp).In comparison to the rat CPD cDNA (ORF of 4134 bp; 180-kDa protein), CPD-N was shorter by approximately 600 bases but contained 148 unique bases at the 5-end to give an ORF of 3399 bp.RT-PCR with primers specific to the 5-end of CPD-N or to CPD showed that the CPD-N transcript was expressed in the Nb2-11C and Nb2-Sp cells but was not detected in rat brain or lung.Conversely, the CPD transcript was expressed in rat brain but was not detected in the two Nb2 cell lines.CPD-N expression (7.5-kb messenger RNA) was stimulated by PRL (10 ng/ml) and/or by interleukin-2 (24 U/ml) in Nb2-11C and Nb2-Sp cells.Most rat tissues expressed multiple CPD transcripts (7.5, 4.1, and 2 kb).Curiously, CPD transcripts were low or undetectable in male rat liver but readily detected in female liver, suggesting that sex-specific hormone levels may regulate its expression.Indeed, CPD expression in the PRLresponsive HepG2 hepatoma and MCF-7 breast cancer cell lines was low in control cells but was markedly stimulated by PRL after 3 h.Consistent with the shorter ORF of CPD-N, Western analysis detected proteins of smaller molecular sizes of 160 kDa (abundant) and 117 kDa (weak) in the Nb2-11C cells.The Nb2-Sp cells expressed a single and abundant 117-kDa protein, implicating differential protein processing in the two cell lines.Rat CPD has been reported to colocalize with the trans-Golgi network marker TGN38.Subcellular fractionation showed predominant nuclear localization of CPD-N and trace amounts were detected in the 100,000 g microsomal fraction after PRL treatment (4 h); in contrast, TGN38 was found only in the microsomal fraction at this time.In cells treated with PRL for 24 h, immunofluorescent confocal microscopy showed nuclear and cytoplasmic distribution of CPD-N.Cytoplasmic CPD-N colocalized with TGN-38 whereas nuclear CPD-N had a mesh-like distribution and colocalized with nuclear lamin B.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».