Cloning, expression and purification of the cytokine FLT3-ligand for protein interaction studies
Notice bibliographique
Résumé
The FLT3-FLT3L receptor complex is responsible for the proliferation and differentiation of hematopoietic progenitor and stem cells, and is involved in several hematological malignancies. A truncated, soluble form of FLT3L was amplified from the full-length sequence by PCR and cloned into a genomic integration and expression vector for Kluyveromyces lactis. Expression and secretion of the 161 amino acid FLT3L was analyzed by SDS-PAGE and Western blot and showed smeared bands around 50kDa consistent with a high level of varying glycosylation as expected. A yield of 100ug/mL of culture was obtained. Purification was performed by Ni-affinity chromatography and the protein was confirmed to be in the elution fraction via mass spectrometry analysis. Purified FLT3L was able to activate RAW264.7 cells after 24hr incubation period causing large vacuoles and a dendritic appearance. FLT3L will be utilized for LARC protein interaction studies to search for interactors that might serve as therapeutic agents in human body fluids and cell culture models of myeloid leukemia.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,003 | 0,003 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».