Molecular Characterization of Canine Prostaglandin G/H Synthase-2 and Regulation in Prostatic Adenocarcinoma Cells in Vitro
Notice bibliographique
Résumé
Induction of PG G/H synthase-2 (PGHS-2), a key rate-limiting enzyme in the PG biosynthetic pathway, has been implicated in prostatic adenocarcinomas in humans and dogs in vivo, but the molecular control of PGHS-2 expression in prostate cancer remains poorly understood. Using the dog model, the specific objectives of this study were to clone and characterize canine PGHS-2, and to study the regulation of its transcript, protein, and activity in a canine prostatic adenocarcinoma (CPA) cell line in vitro. The canine PGHS-2 cDNA was cloned by a combination of cDNA library screening and 5′-rapid amplification of cDNA ends, and shown to contain a 5′-untranslated region of 28 bp, an open reading frame of 1815 bp, and a 3′-untranslated region of 1655 bp. The open reading frame encodes a 604-amino acid protein that is 89% identical to the human homolog. The regulation of PGHS-2 protein and PGE2 synthesis was studied in CPA cells cultured in the absence or presence of graded doses of phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), TNFα, and lipopolysaccharides. Results from immunoblots, immunocytochemistry, and RIAs showed that PGHS-2 protein and PGE2 were present at low levels in control cells and were significantly induced after agonist treatment (P < 0.05), with PMA being the strongest inducer. Northern blot analyses also revealed a significant increase of PGHS-2 mRNA by PMA, TNFα, and lipopolysaccharides treatment (P < 0.05). Agonist-dependent induction of PGHS-2 mRNA was not dependent on new protein synthesis (coincubation with cycloheximide; 10 μg/ml) but was blocked by transcription inhibitor actinomycin D (5 μg/ml), suggesting that PGHS-2 acts an immediate early-response gene in prostatic epithelial cells. Thus, this study characterizes for the first time the structure of canine PGHS-2 and provides an in vitro model to unravel the molecular basis of PGHS-2 expression in prostatic adenocarcinomas.
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Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
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| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
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