Combining resonance energy transfer methods reveals a complex between the α <sub>2A</sub> ‐adrenergic receptor, Gα <sub>i1</sub> β <sub>1</sub> γ <sub>2</sub> , and GRK2
Notice bibliographique
Résumé
ABSTRACT Traditionally, G‐protein‐coupled receptor (GPCR) interactions with their G proteins and regulatory proteins, GPCR kinases (GRKs) and ar‐restins, are described as sequential events involving rapid assemblies/disassemblies. To directly monitor the dynamics of these interactions in living cells, we combined two spectrally resolved bioluminescence and one fluorescence resonance energy transfer (RET) methods. The RET combination analysis revealed that stimulation of the α 2A ‐adrenergic receptor (α 2A AR) leads to the recruitment of GRK2 at a receptor still associated with the Gα i1 β 1 γ 2 complex. The interaction kinetics of GRKs with Gγ 2 (2.8±0.4 s) and α 2A AR (5.2±0.5 s) were similar to that of the receptor‐promoted change in RET between Gα i1 and Gγ 2 (5.2±1.2 s), and persisted until the translocation of βarrestin2 to the receptor, indicating that GRK2 remains associated to the receptor/G‐protein complex for longer periods than anticipated. Moreover, GRK2 or a kinase‐deficient GRK2 mutant, but not GRK5, potentiated the receptor‐promoted changes in RET between Gα i1 and Gγ 2 and abrogated the α 2A AR‐stimulated calcium response, suggesting that the recruitment of GRK2 to the complex contributes to the structural rearrangement and functional regulation of the signaling unit, independently of the kinase activity. RET combination analysis revealed unanticipated dynamics in GPCR signaling and will be applicable to many biological systems.—Breton, B., Lagace, M., Bouvier, M. Combining resonance energy transfer methods reveals a complex between the α 2A ‐adrenergic receptor, Gα i1 β 1 γ 2 , and GRK2. FASEBJ. 24, 4733–4743 (2010). www.fasebj.org
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».