Genetic Engineering of Streptavidin-Binding Peptide Tagged Single-Chain Variable Fragment Antibody to Venezuelan Equine Encephalitis Virus
Notice bibliographique
Résumé
A recombinant gene encoding a single-chain variable fragment (scFv) antibody against Venezuelan equine encephalitis virus (VEE) was cloned into a prokaryotic T7 RNA polymerase-regulated expression vector. A streptavidin-binding peptide gene fused to a 6His tag was attached downstream to the scFv gene. The recombinant fusion protein was expressed in bacteria as inclusion bodies that were subsequently solubilized with 8 M urea and renatured by an arginine system. Purification of the fusion protein was achieved by immobilized metal affinity chromatography. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and Western blotting results revealed that the fusion protein not only retained VEE antigen binding and specificity properties similar to those of its parent native monoclonal antibody (MAb), but also possessed streptavidin-binding activity. This experimental approach can eliminate the need for chemical biotinylation of antibodies and the risk associated of antibody denaturation and can provide a stable and reproducible reagent for rapid and efficient immunoassay of VEE when detected by horseradish peroxidase (HRP)-conjugated streptavidin.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».