Culture media selection and feeding strategy for high titer production of a lentiviral vector by stable producer clones cultivated at high cell density
Notice bibliographique
Résumé
Abstract The growing interest in the use of lentiviral vectors (LVs) for various applications has created a strong demand for large quantities of vectors. To meet the increased demand, we developed a high cell density culture process for production of LV using stable producer clones generated from HEK293 cells, and improved volumetric LV productivity by up to fivefold, reaching a high titer of 8.2 × 10 7 TU/mL. However, culture media selection and feeding strategy development were not straightforward. The stable producer clone either did not grow or grow to lower cell density in majority of six commercial HEK293 media selected from four manufacturers, although its parental cell line, HEK293 cell, grows robustly in these media. In addition, the LV productivity was only improved up to 53% by increasing cell density from 1 × 10 6 and 3.8 × 10 6 cells/mL at induction in batch cultures using two identified top performance media, even these two media supported the clone growth to 5.7 × 10 6 and 8.1 × 10 6 cells/mL, respectively. A combination of media and feed from different companies was required to provide diverse nutrients and generate synergetic effect, which supported the clone growing to a higher cell density of 11 × 10 6 cells/mL and also increasing LV productivity by up to fivefold. This study illustrates that culture media selection and feeding strategy development for a new clone or cell line can be a complex process, due to variable nutritional requirements of a new clone. A combination of diversified culture media and feed provides a broader nutrients and could be used as one fast approach to dramatically improve process performance.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».