Assessment of Viral Vaccine N-Glycosylation via Orthogonal Capillary Electrophoresis-Based Methods
Notice bibliographique
Résumé
Despite global vaccination programs, seasonal influenza continues to pose a significant economic burden and strain on healthcare systems worldwide.Annual reformulation of influenza vaccines is required due to the high mutation rates of surface glycoproteins on influenza viruses.Although vaccination is the most effective preventative measure against influenza viruses, reduced vaccine efficacy in recent years has become an increasing concern.Egg-adaptations incurred through the manufacturing process of influenza vaccines result in antigenic mismatches, whereby vaccine strains differ from the wild-type circulating viruses.In 2017, low vaccine efficacy was attributed to altered glycosylation characteristics of the H3N2 vaccine strain whereby an eggadaptation resulted in the deletion of a single N-glycosylation site.However, even with these implications on immunogenicity, influenza glycosylation is not a well-implemented critical quality attribute and therefore not optimally controlled or regulated during vaccine manufacturing due to assay limitations.Furthermore, current potency evaluation methods are not sensitive enough to capture differences in glycosylation.In this study, capillary zone electrophoresis with laser induced fluorescence (CZE-LIF) and sheathless capillary electrophoresis-mass spectrometry (CESI-MS) methods were developed for the assessment of influenza vaccine N-glycosylation.A magnetic bead-based sample preparation approach was adapted and modified for the fluorescent labeling and CZE-LIF analysis of enzymatically released N-glycans derived from three influenza vaccine monovalent bulk manufacturers.A filter-aided dual hydrazide labeling strategy was developed and elucidation of N-glycan structures was achieved using an untargeted sheathless CESI-MS/MS approach.There is currently a lack of standardized methods for analyzing Nglycosylation; therefore, this study highlights the utility of capillary electrophoresis-based methods for analysis of influenza vaccine N-glycosylation.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».