Abstract 20 A Rapid and Sensitive IL-3-Based Assay Reveals How Various Pre-Processing Conditions Affect the Potency of Hematopoietic Stem Cells in Fresh Cord Blood Units
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Introduction Optimized procedures to collect, process, and store cord blood (CB) units are crucial to ensure stem cell product quality; however, current methods to assess hematopoietic stem cell (HSC) potency are time-consuming or lack sensitivity. Therefore, developing methods that rapidly and accurately portray HSC potency in fresh blood is important to help optimize clinical outcomes. Objective We sought to adapt to fresh CB a potency assay previously developed for HSCs contained in cryopreserved CB [Simard et al. Transfusion. 2019;59(6):2074-2083.]. We next used the assay to evaluate the impact of various CB processing conditions on HSC potency. Methods Fresh CB units were exposed to various pre-processing storage conditions (ie, temperature changes and various anticoagulants). Units were then analyzed at various time points up to 96 hours using traditional iShage and colony-forming assays, in parallel with the IL-3-based potency assay. Results For CB units maintained at room temperature (RT), the potency measured with the IL-3-based assay (ie, the proportion of IL-3-responsive CD34+ cells as measured by pStat5 activation) linearly decreased over time. A potency of 69% was observed when tested within 0-24 hours, compared with 56% and 40% in the 24-48–hour and the 48-72–hour groups, respectively. In addition, the IL-3-based assay showed that pre-processing storage at 4°C prevented this loss of HSC potency. By contrast, the HSC count by iShage and the CFU numbers remained unchanged with time or temperature variations. Discussion The newly developed IL3-based assay appears reliable and sensitive to characterize the potency of CD34+ cells in fresh CB. In addition, this assay indicated that HSC potency linearly decreased with time when CB units were maintained at RT but remained stable when units were stored at 4°C pre-processing. This temperature-related difference was not observed with traditional assays, indicating that the test could be a complementary tool to characterize CB units in research and operational settings.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,003 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».