Substantially Improved Electrofusion Efficiency of Hybridoma Cells: Based on the Combination of Nanosecond and Microsecond Pulses
Notice bibliographique
Résumé
As the initial antibody technology, the preparation of hybridoma cells has been widely used in discovering antibody drugs and is still in use. Various antibody drugs obtained through this technology have been approved for treating human diseases. However, the key to producing hybridoma cells is efficient cell fusion. High-voltage microsecond pulsed electric fields (μsHVPEFs) are currently one of the most common methods used for cell electrofusion. Nevertheless, the membrane potential induced by the external microsecond pulse is proportional to the diameter of the cell, making it difficult to fuse cells of different sizes. Although nanosecond pulsed electric fields (nsPEFs) can achieve the fusion of cells of different sizes, due to the limitation of pore size, deoxyribonucleic acid (DNA) cannot efficiently pass through the cell pores produced by nsPEFs. This directly causes the significant loss of the target gene and reduces the proportion of positive cells after fusion. To achieve an electric field environment independent of cell size and enable efficient cell fusion, we propose a combination of nanosecond pulsed electric fields and low-voltage microsecond pulsed electric fields (ns/μsLVPEFs) to balance the advantages and disadvantages of the two techniques. The results of fluorescence experiments and hybridoma culture experiments showed that after lymphocytes and myeloma cells were stimulated by a pulse (ns/μsLVPEF, μsHVPEF, and control), compared with μsHVPEF, applying ns/μsLVPEF at the same energy could increase the cell fusion efficiency by 1.5-3.0 times. Thus far, we have combined nanosecond and microsecond pulses and provided a practical solution that can significantly increase cell fusion efficiency. This efficient cell fusion method may contribute to the further development of hybridoma technology in electrofusion.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».