Fluorescence Imaging of Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa-B Ligand-Mediated Calcium Oscillations in Osteoclasts
Notice bibliographique
Résumé
Background: Numerous bone diseases are caused by abnormal activity of osteoclasts, cells responsible for physiological bone degradation. Understanding the mechanisms of osteoclast formation and activation is important for developing diagnostic tools and treatments for various bone diseases. Receptor activator of nuclear factor κB ligand (RANKL), a key osteoclastogenic cytokine, induces changes in intracellular Ca2+ con- centration ([Ca2+]i) that can be visualized and measured with a fluorescent Ca2+ binding dye. The objective of the study was to characterize the changes in [Ca2+]i induced by acute application of RANKL in osteoclast precursors. Methods: We performed calcium imaging in osteoclast precursors generated from RAW 264.7 cells loaded with Fura-2 fluorescent dye using an inverted microscope, Nikon TE2000-U. Data was collected with Volocity software and analysed in Excel and MATLAB. Results: In osteoclast precursors, RANKL induced oscillations in [Ca2+]i within 2 minutes of exposure. The main frequency of oscillations was approximately 37.7 mHz. However, no significant change in the mean level of intracellular Ca2+ was observed. Interestingly, when ATP was applied to RANKL-treated osteoclast precursors, it induced a long-lasting increase in [Ca2+]i compared to control cells. Limitations: The limitations of our study included the small number of replicates and the short duration of fluorescence recording under each condition. Conclusions: Short exposure of osteoclast precursors to RANKL not only induced oscillations in calcium con- centration, but also modulated cellular response to the subsequent application of ATP.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».