An HPLC-UV validated bioanalytical method for measurement of <i>in vitro</i> phase 1 kinetics of α-synuclein binding bifunctional compounds
Notice bibliographique
Résumé
Aggregates of the protein α-synuclein are associated with pathophysiology of Parkinson’s disease and are present in Lewy Bodies found in the brains of Parkinson’s patients. We previously demonstrated that bifunctional compounds composed of caffeine linked via a 6 carbon chain to either 1-aminoindan (C8-6-I) or nicotine (C8-6-N) bind α-synuclein and protect yeast cells from α-synuclein mediated toxicity.A critical step in development of Positron Emission Tomography (PET) probes for neurodegenerative diseases is evaluation of their metabolic stability. We determined that C8-6-I, and C8-6-N both undergo phase 1 P450 metabolism in mouse, rat, and human liver microsomes. We utilized this metabolic information to guide the design of fluorinated analogs for use as PET probes and determined that the fluorine in 19F-C8-6-I and 19F-C8-6-N is stable to P450 enzymes.We have developed and validated an analytical HPLC-UV method following FDA and EMA guidelines to measure in vitro Phase 1 kinetics of these compounds and determine their Vmax, KM and CLint,u in mouse liver microsomes. We found that C8-6-I and 19F-C8-6-I have a 2 - 4 fold lower CLint,u than C8-6-N, and 19F-C8-6-N. Our approach shows a simple, specific, and effective step by step system to design and develop compounds as PET probes.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,003 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,002 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,002 | 0,002 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».