Molecular mechanism of tRNA binding by the <i>Escherichia coli</i> N7 guanosine methyltransferase TrmB
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Among the large and diverse collection of tRNA modifications, 7-methylguanosine is frequently found in the tRNA variable loop at position 46. This modification is introduced by the TrmB enzyme, which is conserved in bacteria and eukaryotes. Complementing the report of various phenotypes for different organisms lacking TrmB homologs, we report here hydrogen peroxide sensitivity for the Escherichia coli ΔtrmB knockout strain. To gain insight into the molecular mechanism of tRNA binding by E. coli TrmB in real-time, we developed a new assay based on introducing a 4-thiouridine modification at position 8 of in vitro transcribed tRNA Phe enabling us to fluorescently labelled this unmodified tRNA. Using rapid kinetic stopped-flow measurements with this fluorescent tRNA, we examined the interaction of wild-type and single substitution variants of TrmB with tRNA. Our results reveal the role of SAM for rapid and stable tRNA binding, the rate-limiting nature of m 7 G46 catalysis for tRNA release, and the importance of residues R26, T127 and R155 across the entire surface of TrmB for tRNA binding.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».