A novel tool to study bipolar cell responses in glaucoma
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Purpose: Retinal ganglion cell death has been well studied in glaucoma, however how the calcium (Ca 2+ ) dynamics in living inner retinal neurons alter to ocular hypertensive stress is poorly understood. Here we characterized a novel adeno‐associated virus (AAV) mediated Ca 2+ sensor to investigate light‐evoked Ca 2+ responses in bipolar cells with two‐photon laser scanning microscopy (TPLSM). Methods: To visualize ON bipolar cell specific Ca 2+ expression, we bioinformatically designed a serotype 2 AAV vector carrying GCaMP6f, a Ca 2+ indicator, under human MiniPromoter: Ple265 ( PCP2 , 986 bp, AAV.Ple265.GCaMP). The AAV.Ple265.GCaMP6 was administered intravitreal to adult mice (2 μl/eye). Two and 4 weeks later ( n = 3 mice/group), eyes were collected, and retinal cross sections (16 μm) were prepared for immunohistochemistry using the following primary antibodies: GFP to visualize GCaMP6f, and bipolar cell‐specific markers PCP2 or PKCa. Furthermore, we monitored real time light‐evoked Ca 2+ responses in bipolar cell terminals at 4 weeks after the injection and amplitude (ΔF/F 0 ) was calculated. Results: At 2 weeks after the viral injection, GCaMP6f was clearly visualized in bipolar cells, but its expression was limited to the cell body and dendritic trees. Four weeks post‐injection, GCaMP6f expression was abundantly detected in many bipolar cell bodies, dendrites, axons, and axonal terminals. TPLSM allowed visualization of bipolar cell‐specific GCaMP6f expression in axonal terminals in vivo, and light‐evoked sustained ON‐responses were recorded in terminal microdomains (average intensity = 1.25 ΔF/F 0 ). Conclusions: Our study reveals that the AAV.Ple265.GCaMP is a powerful tool to monitor ON bipolar cell specific light‐evoked Ca 2+ responses in bipolar cells, and can be potentially used for studies aimed at understanding the response of these neurons to glaucomatous damage.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».