Fast and easy isolation of CD27-positive human memory B cells using EasySep&[trade] Releasable RapidSpheres&[trade]
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Over the course of a lifetime, memory B cells are key to maintaining antibody-mediated protection from viral and bacterial pathogens and they are one outcome of an effective vaccine. Since memory B cells are typically found at frequencies of less than 5% of normal human peripheral blood mononuclear cells (PBMC), research into their function would be aided by a fast and easy isolation method. To meet this need, we have developed an improved EasySep™ kit for the isolation of CD27-positive (CD27+) human memory B cells from fresh PBMC. First, CD27+ cells are labeled using an antibody cocktail and EasySep™ Releasable RapidSpheres™ and are positively selected using a hand-held EasySep™ magnet. Next, magnetic particles are released from the positively-selected cells, and then non-B cells within the CD27+ fraction are targeted for depletion using a second antibody cocktail and EasySep™ Dextran RapidSpheres™. Following an additional magnetic separation step, the particle-free, CD27+ memory B cells are poured off into a new tube and ready for use. With one additional step, CD27− naive B cells can be isolated from the same starting sample. The entire isolation protocol is completed in under 40 minutes without any centrifugation steps. Using this method, CD19+CD27+ memory B cells can be isolated to 97±2% purity and 37±14% recovery (average of n=19 ± S.D.). The CD19+CD27− naive B cells can be isolated to 93±5% purity and 28±11% recovery (n=9 ± S.D.). When stimulated with CpG and IL-15, the isolated memory and naive B cells are functional, as assessed by both proliferative responses and the secretion of IgG.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,006 | 0,006 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».