Efficient isolation of particle-free human ILC2s from peripheral blood mononuclear cells
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Group 2 innate lymphoid cells (ILC2s) have important roles in type-2 immune responses and are implicated in allergies, asthma, helminth infections and other metabolic diseases. To better understand their role in immunity, highly purified ILC2s are required. ILC2s are phenotypically defined as CD45+ lineage-negative CRTH2+ CD127+ CD161+, and comprise approximately 0.05% of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs). Fluorescence activated cell sorting is the most common method to isolate ILC2s but it is both time-consuming and expensive because the cells are so rare. To address this issue, we have developed an immunomagnetic isolation method to obtain highly pure, particle-free ILC2s from human PBMCs in 2.5 hours. First, CRTH2 positive cells are labelled with a CRTH2-PE monoclonal antibody. These cells are then positively selected using an anti-PE antibody complex, EasySep™ Releasable RapidSpheres™ and an EasySep™ magnet. After separation, the magnetic particles are released from the positively selected cells and a second cocktail of antibody complexes and EasySep™ Dextran RapidSpheres™ is added to label non-ILC2s within the CRTH2 positive population. After a second separation, the released particles and unwanted cells are retained in the tube within the magnet, whereas the ILC2s are simply poured off and ready for use. With this method, the purity of ILC2s isolated from PBMCs was 84–95% (median 91%, n=18) with a recovery of 0.4–14.3×103 ILC2s per 108 starting PBMCs (median 2.46×103, n=18). The isolated ILC2s are functional, producing IL-13 upon in vitro stimulation with IL-33 and IL-2. Overall, EasySep™ Human ILC2 Isolation Kit allows researchers to easily and efficiently isolate highly pure and functional ILC2s.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».