Column-free isolation of untouched mouse plasmacytoid dendritic cells (P4149)
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Plasmacytoid dendritic cells (pDC) are a DC subset distinct from conventional dendritic cells (cDC) in that they are able to produce large amounts of type I interferon (IFN) after challenge with pathogens. Viruses activate pDC mainly through Toll-like receptors (TLR). Unlike cDC, pDC are poor antigen-presenting cells. In line with the functional differences, pDC express lower levels of CD11c and MHCII as compared to cDC. Moreover, a number of markers expressed by pDC are absent on cDC including: PDCA-1, Siglec-H, B220 and Ly-6C. pDC are found in both lymphoid and non-lymphoid organs. Here, we describe a negative selection method to isolate untouched pDC from mouse spleen. This method uses an immunomagnetic, column-free cell separation technology (EasySepTM). Briefly, single cell suspensions of splenocytes are labeled with biotinylated antibodies against non-pDC. Bi-specific antibody complexes against biotin and dextran are used to cross-link non-pDC with dextran-coated magnetic particles. The unwanted cells are then removed using an EasySepTM magnet. The procedure can be automated using RoboSepTM. Starting with 0.4±0.2% CD11c+PDCA-1+ pDC in spleen, purities of 79±9% (n=21) are achieved. The isolated pDC are functional and produce IFN-α in response to TLR9 ligand, ODN-1585 as measured in ELISA. pDC play an important role in anti-viral immunity and autoimmunity, therefore the isolation of untouched pDC is critical in studies examining their role in these immune responses.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,003 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».