An optimized and validated protocol for the purification of PDGFRα+ oligodendrocyte precursor cells from mouse brain tissue via immunopanning
Notice bibliographique
Résumé
Immunopanning is an efficient and reliable method for isolating primary cells from rodent brain tissue, making it a valuable tool for researchers interested in in vitro glial models. Here, we present an immunopanning protocol optimized for the isolation of Platelet-Derived Growth Factor Receptor Alpha positive (PDGFRα+) oligodendrocyte precursor cells (OPCs) from mouse brain tissue that results in a high yield of pure OPCs from minimal quantities of starting tissue. •The protocol presented here is optimized for a PDGFRα-dependent selection of mouse OPCs using a commercial antibody, accounting for the relatively weaker adhesion of OPCs to the anti-PDGFRα plate as compared to other oligodendrocyte lineage markers (e.g., MOG). •A modified papain digestion step, with 95% O 2 /5% CO 2 gas that is humidified prior to perfusion, significantly enhances the yield of dissociated cells and final yield of OPCs. •Isolating OPCs at the PDGFRα+ stage permits the expansion of cells in culture, facilitating studies using transgenic mice, and enables studies on the development of the oligodendrocyte lineage without the spatial and temporal complexity of in vivo studies.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,002 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,002 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,004 | 0,004 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».