A Pilot Study to Detect Viable Salmonella spp. in Diarrheal Stool Using Viability Real-Time PCR as a Culture-Independent Diagnostic Tool in a Clinical Setting
Notice bibliographique
Résumé
Frontline laboratories are adopting culture-independent diagnostic testing (CIDT) such as nucleic acid amplification tests (NAATs) due to numerous advantages over culture-based testing methods. Paradoxically, the viability of pathogens, a crucial factor determining active infections, cannot be confirmed with current NAATs alone. A recent development of viability PCR (vPCR) was introduced to mitigate this limitation associated with real-time PCR (qPCR) by using a DNA-intercalating dye to remove residual and dead cell DNA. This study assessed the applicability of the vPCR assay on diarrheal stools. Eighty-five diarrheal stools confirmed for Salmonellosis were tested via qPCR and vPCR using in-house primers and probe targeting the invA gene. vPCR-negative stools (Ct cut off > 31) were enriched in mannitol selenite broth (MSB) to verify low bacterial loads. vPCR assay showed ~89% sensitivity (qPCR- and vPCR-positive stools: 76/85). vPCR-negative stools (9/85; qPCR-positive: 5; qPCR-negative: 4) were qPCR- and culture-positive post-MSB-enrichment and confirmed the presence of low viable bacterial loads. Random sampling error, low bacterial loads, and receiving stools in batches could contribute to false negatives. This is a pilot study and further investigations are warranted to explore vPCR to assess pathogen viability in a clinical setting, especially when culture-based testing is unavailable.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,003 | 0,003 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».