Abstract PO-097: Tumor-associated extracellular vesicles from HPV+ oropharyngeal cancer lymphatic fluid trigger an anti-tumor response through activation of the cGAS-STING pathway
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Background: Human papillomavirus (HPV)-associated oropharyngeal squamous cell carcinoma (OPC) is increasing rapidly in incidence and is now the most common HPV-associated malignancy in the U.S. Our group previously demonstrated that lymph-enriched fluid from surgical drains in HPV+ OPC patients is rich in tumor-derived cell-free DNA, with prognostic implications. In this study, we characterize extracellular vesicles (EVs) derived from cervical lymph in HPV+ OPC patients and explore the impact on innate immune response. The cyclic GMP-AMP synthase (cGAS) pathway plays a key role in immune response by detecting pathogenic or damaged host DNA. We propose that HPV DNA-containing EVs uptake by HPV-negative cells modulates their immune responses via activation of cGAS-STING signaling. Methods: Surgical lymphatic fluid samples were collected from 31 HPV(+) and 10 HPV(-) OPC patients 24 hours post neck dissection, along with supernatant from HPV(+) and HPV(-) OPC cell lines. EVs were isolated from both biofluids and characterized using immunoblotting, transmission electron microscopy (TEM), and nanoparticle tracking analysis (NTA). EVs were then treated with DNase to eliminate external DNA before extracting EV DNA. Lymph cell-free DNA (cfDNA) was also extracted. We used qPCR to quantify HPV16 levels in supernatant and lymph EVs. Next, we incubated HPV(-) OPC cells with EVs that were isolated from the supernatant from HPV (+) or HPV (-) cells. Finally, we compared cGAS-STING activation induced by HPV (+) EVs to the STING agonist 2,3-GAMP (Sigma) through IFNβ mRNA expression and phosphor-TBK1 immunoblotting. Results: Lymphatic EVs showed typical morphology with diameters ranging 70–150 nm, and were CD63 and TSG101 positive by immunoblot. 27 HPV (+) OPC patients (87%) had detectable HPV16 DNA in their postoperative lymph EVs, while all HPV(-) lymph EVs were negative for HPV16. Comparison of bulk lymph cfDNA and lymph EV DNA showed a significant proportion (39.5±24.4%) of lymph HPV16 DNA is contained by EVs. Further, an EV uptake assay showed HPV16 DNA was trafficked into HPV(-) cells through EVs, and blocking EV internalization with heparin reduced recipient cell HPV16 levels. Crucially, HPV (-) cells cultured with HPV (+) EVs for 8 hours increased IFNβ1 expression, while HPV(-) EVs did not increase IFNβ1 expression. Lastly, we observed TBK1 phosphorylation, a reporter of STING activation, was elevated in these cells treated with HPV(+) EVs. Conclusions: Our study is the first to characterize tumor-associated EVs in lymphatic fluid. We showed many of these tumor-associated lymph EVs in HPV(+) patients harbor HPV16. Additionally, we demonstrate lymph EVs containing HPV16 activate cellular cGAS-STING intermediates. Ongoing studies are investigating the impact of EVs on the tumor microenvironment. Citation Format: Zhongping Xu, Noah Earland, Peter K. Harris, Sophie P. Gerndt, Ricardo Ramirez, Nicholas P. Semenkovich, Aadel A. Chaudhuri, Jose P. Zevallos. Tumor-associated extracellular vesicles from HPV+ oropharyngeal cancer lymphatic fluid trigger an anti-tumor response through activation of the cGAS-STING pathway [abstract]. In: Proceedings of the AACR-AHNS Head and Neck Cancer Conference: Innovating through Basic, Clinical, and Translational Research; 2023 Jul 7-8; Montreal, QC, Canada. Philadelphia (PA): AACR; Clin Cancer Res 2023;29(18_Suppl):Abstract nr PO-097.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,003 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».