Anaerobic fluorescent reporters for live imaging of Pseudomonas aeruginosa
Notice bibliographique
Résumé
Pseudomonas aeruginosa thrives in the airways of individuals with cystic fibrosis, in part by forming robust biofilms that are resistant to immune clearance or antibiotic treatment. In the cystic fibrosis lung, the thickened mucus layers create an oxygen gradient, often culminating with the formation of anoxic pockets. In this environment, P. aeruginosa can use nitrate instead of oxygen to grow. Current fluorescent reporters for studying P. aeruginosa are limited to the GFP and related analogs. However, these reporters require oxygen for the maturation of their chromophore, making them unsuitable for the study of anaerobically grown P. aeruginosa. To overcome this limitation, we evaluated seven alternative fluorescent proteins, including iLOV, phiLOV2.1, evoglow-Bs2, LucY, UnaG, Fluorescence-Activating and Absorption-Shifting Tag (FAST), and iRFP670, which have been reported to emit light under oxygen-limiting conditions. We generated a series of plasmids encoding these proteins and validated their fluorescence using plate reader assays and confocal microscopy. Six of these proteins successfully labeled P. aeruginosa in anoxia. In particular, phiLOV2.1 and FAST provided superior fluorescence stability and enabled dual-color imaging of both planktonic and biofilm cultures. This study provides a set of fluorescent reporters for monitoring P. aeruginosa under low-oxygen conditions. These reporters will facilitate studies of P. aeruginosa in biofilms or other contexts relevant to its pathogenesis, such as those found in cystic fibrosis airways. Due to the broad host range of our expression vector, the phiLOV2.1 and FAST-based reporters may be applicable to the study of other Gram-negative bacteria that inhabit similar low-oxygen niches.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,000 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».