Synthesis of an <i>Ortho</i>‐Functionalized Tetrafluorinated Azobenzene Phosphoramidite for Incorporation into a Tetrafluorinated Azobenzene‐Containing siRNA for Photocontrolled Gene Silencing
Notice bibliographique
Résumé
Abstract This article presents the detailed synthesis and characterization protocols for an ortho‐functionalized tetrafluorinated azobenzene containing siRNA, which has photoswitchable properties. To design this tetrafluorinated azobenzene scaffold, several synthetic steps are performed to generate a symmetrical tetrafluorinated azobenzene diol. This diol is treated with dimethoxytrityl chloride (DMT‐Cl) to protect one of the alcohols. Next, the DMT‐protected tetrafluorinated monoalcohol is phosphitylated to afford the DMT‐phosphoramidite building block used for solid‐phase synthesis. This paper also contains the detailed biophysical characterization, biological testing, and photo‐switching protocols of an ortho‐functionalized fluorinated azobenzene containing siRNA (F‐siRNA), which has photoswitchable properties that can be controlled with visible light. First, the F‐siRNA was characterized by annealing the sense and antisense strands together and then measuring the circular dichroism (CD) profile and melting temperature (Tm) of the duplexes. Second, biological testing of the F‐siRNA is performed in cell culture to determine their gene silencing efficacy. Finally, their gene‐silencing activities are measured after exposure to green light to inactivate the F‐siRNA, followed by blue light, which reactivates the F‐siRNA. The F‐siRNA can be kept inactive for up to 72 hr and reactivated at any time within this 72‐hr window. © 2023 Wiley Periodicals LLC.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».