Isolation and expansion of pure and functional γδ T cells
Notice bibliographique
Résumé
Abstract γδ T cells are important components of the immune system due to their ability to elicit a fast and strong response against infected and transformed cells. Because they can specifically and effectively kill target cells in an MHC independent fashion, there is great interest to utilize these cells in anti-tumor therapies where antigen presentation may be hampered. Since only a small fraction of T cells in the blood or tumor tissue are γδ T cells, they require extensive expansion to allow for fundamental, preclinical and ex vivo research. Although expansion protocols can be successful, most are based on depletion of other cell types rather than γδ T cell specific isolation, resulting in unpredictable purity of the isolated fraction. Moreover, the primary focus only lies with expansion of Vδ2 + T cells, while Vδ1 + T cells likewise have anti-tumor potential. Here, we investigated whether γδ T cells directly isolated from blood could be efficiently expanded while maintaining function. γδ T cell subsets were isolated using MACS separation, followed by FACS sorting, yielding >99% pure γδ T cells. Isolated Vδ1 + and Vδ2 + T cells could effectively expand immediately after isolation or upon freeze/thawing and reached expansion ratios between 200 to 2000-fold starting from varying numbers using cytokine supported feeder stimulations. After expansion, potential effector functions of γδ T cells were demonstrated by IFN-γ, TNF-α and granzyme B production upon PMA/ionomycin stimulation and effective killing capacity of multiple tumor cell lines was confirmed in killing assays. In conclusion, pure γδ T cells can productively be expanded while maintaining their anti-tumor effector functions against tumor cells. Moreover, γδ T cells could be expanded from low starting numbers suggesting that this protocol may even allow for expansion of cells extracted from tumor biopsies.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».