Characterization of Anti‐SOD1 Antibodies and Detection of Intermediary SOD1 Oligomers
Notice bibliographique
Résumé
Mutations in the gene encoding the enzyme copper‐zinc superoxide dismutase (SOD1) are linked to 10–20% of familial amyotrophic lateral sclerosis (fALS) cases. The mutations lead to misfolding and self‐assembly of SOD1 into toxic oligomers and aggregates, resulting in motor neuron degeneration. However, the molecular mechanisms underlying SOD1 aggregation and toxicity are unclear. Characterization and detection of SOD1 oligomers is particularly challenging due to their metastable nature. Antibodies against oligomeric and misfolded SOD1 forms are useful tools for this purpose, provided their specificity and selectivity are well characterized, which is not always the case. In this study, we set out to characterize three novel anti‐misfolded SOD1 antibodies and compare them with two commercial anti‐misfolded SOD1 antibodies raised against G93A SOD1. As controls, we compared the reactivity of these antibodies to two polyclonal anti‐SOD1 antibodies that were expected to be insensitive to misfolding. We asked whether the antibodies could distinguish among native and misfolded conformations of SOD1 and whether any of them were specific for the elusive oligomeric forms of the protein. To follow SOD1 conformational change and aggregation kinetics, wild‐type and G93A SOD1 were incubated under reducing conditions and the reactions were followed using thioflavin T (ThT) fluorescence, electron microscopy (EM), and dot blots with each antibody. Control reactions were followed under non‐reducing conditions. The three new anti‐misfolded SOD1 and one of the commercial antibodies (B8H10) showed maximum affinity at the time oligomers were expected to dominate and lost affinity with fibril formation. Unexpectedly, the two polyclonal antibodies also showed preference for oligomers, especially of G93A SOD1. Surprisingly, the other commercial anti‐misfolded SOD1 antibody, C4F6, showed specificity for G93A SOD1 regardless of misfolding. Two of the new antibodies showed preference for early or late oligomers, suggesting that they could expand currently detectable temporal resolution. In conclusion, our data indicate that certain antibodies are highly sensitive to the misfolded form of SOD1, whereas others are insensitive to either mutation or aggregation. Support or Funding Information RGK Foundation
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».