Manipulation of mitochondrial poly(A) polymerase family proteins in Trypanosoma brucei impacts mRNA termini processing
Notice bibliographique
Résumé
RNA-specific nucleotidyltransferases (rNTrs) add nontemplated nucleotides to the 3 ′ end of RNA. Two noncanonical rNTRs that are thought to be poly(A) polymerases (PAPs) have been identified in the mitochondria of trypanosomes – KPAP1 and KPAP2. KPAP1 is the primary polymerase that adds adenines (As) to trypanosome mitochondrial mRNA 3 ′ tails, while KPAP2 is a non-essential putative polymerase whose role in the mitochondria is ambiguous. Here, we elucidate the effects of manipulations of KPAP1 and KPAP2 on the 5 ′ and 3 ′ termini of transcripts and their 3 ′ tails. Using glycerol gradients followed by immunoblotting, we present evidence that KPAP2 is found in protein complexes of up to about 1600 kDa. High-throughput sequencing of mRNA termini showed that KPAP2 overexpression subtly changes an edited transcript’s 3 ′ tails, though not in a way consistent with general PAP activity. Next, to identify possible roles of posttranslational modifications on KPAP1 regulation, we mutated two KPAP1 arginine methylation sites to either mimic methylation or hypomethylation. We assessed their effect on 3 ′ mRNA tail characteristics and found that the two mutants generally had opposing effects, though some of these were transcript-specific. We present results suggesting that while methylation increases KPAP1 substrate binding and/or initial nucleotide additions, unmethylated KPAP1is more processive. We also present a comprehensive review of UTR termini, and evidence that tail addition activity may change as mRNA editing is initiated. Together, this work furthers our understanding of the role of KPAP1 and KPAP2 on trypanosome mitochondrial mRNA 3 ′ tail addition, as well as provides more information on mRNA termini processing in general.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
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Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».