Abstract 1570 Design and Expression of an Ankyrin-like Molecular Probe for α-Neurexin 1 Labelling in Live Neurons
Notice bibliographique
Résumé
Neurexins (NRXNs) are a set of polymorphic cell adhesion molecules that play a key role in formation of new synaptic connections and pre-synaptic differentiation. Multiple binding partners for both α- and β- neurexins help shape the synaptic terminal and stablish stable connections between neurons. Additionally, NRXNs participate in remodelling of synapses terminal and the establishment of new connections. Impairment of proper neurexin function has been related to several psychological, developmental disorders and have been proposed to play a role in neurodegenerative pathogenesis in Alzheimer's disease alongside their post-synaptic counterpart neuroligin 1 (NLGN1). However, we lack the tools to study molecular mechanisms involving neurexins impairments in live cells without undergoing genetic engineering or heterologous gene expression. Herein we describe the development of a selective molecular probe for a-NRXN 1 to allow the real-time tracking of the receptor in live neurons. To achieve this, we used α-latrotoxin (α-LTX), a neurotoxin from the Latrodectus genus. Docking simulations were carried out to determine the binding domain to α-NRXN. We generated a bacterial recombinant expression vector to produce an ankyrin-like fragment of α-LTX. This α-LTX fragment was then used in transfected HEK 293 cells with α-NRXN 1 to measure binding selectivity and cytotoxicity. The final molecular probe offers a new approach for neurexin labelling in live cells to track its dynamic re-organization at synaptic termini during synaptic plasticity. This research was supported in part by the Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada (NSERC 2020-06103) and the University of British Columbia. We gratefully thank UBC Okanagan College of Graduate Studies for active support and research scholarships.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».