Development of a qPCR and a Lamp Assay for <i>Verticillium longisporum</i> Detection and a Triplex qPCR Assay for Simultaneous Detection of <i>V. longisporum</i>, <i>Leptosphaeria biglobosa</i>, and <i>L. maculans</i> from Canola Samples
Notice bibliographique
Résumé
Verticillium wilt, Verticillium stem striping, and Verticillium stripe are common disease names that all denote infection caused by Verticillium longisporum on canola or other brassica crops. In this study, a quantitative PCR (qPCR) and a loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay were developed for the detection of V. longisporum from canola stem samples. Both assays are specific to V. longisporum at the species level and ubiquitous at the strain level across all whole-genome sequenced strains. The low limit for positive detection of the two assays is 1 pg fungal DNA in a 20-µl reaction or 700 fungal cells in 100-mg plant tissue. The qPCR assay was combined with the duplex qPCR assay for the two blackleg pathogens, Leptosphaeria biglobosa and L. maculans, to constitute a triplex qPCR system for simultaneous detection of all three pathogens. The usefulness of this triplex qPCR system was verified on canola samples collected from various locations in Alberta, Canada. Using this triplex qPCR system, V. longisporum was detected from one sample, while the two blackleg pathogens were detected at higher frequencies. Since it is sometimes difficult to differentiate Verticillium stripe and blackleg on Alberta canola samples based on visual symptoms, the triplex qPCR system is an important tool for the detection of V. longisporum, especially when its presence is masked or obscured by symptoms of blackleg. [Formula: see text] Copyright © 2024 The Author(s). This is an open access article distributed under the CC BY-NC-ND 4.0 International license .
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,002 | 0,002 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».