Amanitin determination in bile samples by UHPLC-MS: LR-MS and HR-MS analytical performance
Notice bibliographique
Résumé
Consumption of misidentified foraged mushrooms containing bicyclic amanitin octapeptides is a worldwide public health and veterinary problem, being considered one of the deadliest accidental human and canine food ingestion due to acute liver failure (ALF). Reversal of advanced ALF and complete clinical recovery can be achieved following definitive removal of accumulated amatoxin laden bile from the gallbladder. An accurate means of quantifying amanitin content in aspirated bile is, therefore, urgently needed. Building on our prior work validating a method to detect and quantify amanitin in hepatic autopsy tissue, the development of an accurate method of measuring α- and β-amanitin in aspirated gallbladder bile was performed to evaluate the efficiency of this emergency procedure applied as a clinical treatment for intoxicated patients. A solid-phase extraction (SPE) procedure was optimized followed by detection based on ultra-high performance liquid chromatography coupled with mass spectrometry (UHPLC-MS). Low resolution mass spectrometry (LRMS) was compared with high resolution (HRMS) by the validation of UHPLC-MS/MS (triple quadrupole MS) and UHPLC-ToF-MS (time-of-flight MS). Both methods were able to detect amatoxins in bile with limits of detection and quantification ranging from 2.71 to 3.46 µg.kg-1, and 8.36 to 9.03 µg.kg-1 for α-amanitin and, 0.32 to 1.69 µg.kg-1 and 0.55 to 5.62 µg.kg-1 for β-amanitin, respectively. Validation was completed with the evaluation of linearity, specificity, robustness, recovery, and precision following the ICH guidelines and CIR 808/2021. The validated methods were finally applied to bile samples obtained 48- 96 hours + post-ingestion from 4 amatoxin poisoning patients who underwent gallbladder drainage procedures in Vietnam, Canada, and California. Gallbladder bile from patients with amatoxin mushroom poisoning contained significant amanitin content, even when aspirated several days post-ingestion, thus confirming the important role of enterohepatic circulation in amatoxin hepatotoxicity. This work represents a high and unique analytical throughput in amanitin poisoning allowing to efficiently respond to this fatal health problem.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».