Isolation and adipogenic differentiation of murine mesenchymal stem cells harvested from macrophage-depleted bone marrow and adipose tissue
Notice bibliographique
Résumé
INTRODUCTION AND PURPOSE: Mouse mesenchymal stem cells (MSCs) provide a resourceful tool to study physiological and pathological aspects of adipogenesis. Bone marrow-derived MSCs (BM-MSCs) and adipose tissue-derived MSCs (ASCs) are widely used for these studies. Since there is a wide spectrum of methods available, the purpose is to provide a focused hands-on procedural guide for isolation and characterization of murine BM-MSCs and ASCs and to effectively differentiate them into adipocytes. METHODS AND RESULTS: Optimized harvesting procedures for murine BM-MSCs and ASCs are described and graphically documented. Since macrophages reside in bone-marrow and fat tissues and regulate the biological behaviour of BM-MSCs and ASCs, we included a procedure to deplete macrophages from the MSC preparations. The identity and stemness of BM-MSCs and ASCs were confirmed by flow cytometry using established markers. Since the composition and concentrations of adipogenic differentiation cocktails differ widely, we present a standardized four-component adipogenic cocktail, consisting of insulin, dexamethasone, 3-isobutyl-1-methylxanthine, and indomethacin to efficiently differentiate freshly isolated or frozen/thawed BM-MSCs and ASCs into adipocytes. We further included visualization and quantification protocols of the differentiated adipocytes. CONCLUSION: This laboratory protocol was designed as a step-by-step procedure for harvesting murine BM-MSCs and ASCs and differentiating them into adipocytes.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».