Effect of chemical modification on the distribution of electrophoretic mobilities of individual molecules of <i>E. coli</i> β-galactosidase
Notice bibliographique
Résumé
Escherichia coli β-galactosidase was labelled with 1 mmol/L fluorescein 5-carbamoylmethylthiopropanoic N-hydroxysuccinimidyl ester for 1 and 3 min. The samples were separated by capillary electrophoresis and peak areas compared to that of labelled BSA for the purpose of quantification of the concentration of attached label. Enzyme concentration in the samples was determined by single molecule counting. The average number of labels attached to each molecule of enzyme was found to be 3.1 and 4.5 when labelled for 1 and 3 min, respectively. The distribution of single enzyme molecule electrophoretic mobilities for the unlabelled enzyme and that labelled for 1 and 3 min were measured using capillary electrophoresis. The average mobilities were found determined to be −(1.99 ± 0.13) × 10 –8 m 2 V −1 s −1 ( N = 39), −(2.16 ± 0.19) × 10 –8 m 2 V −1 s −1 ( N = 46), and –(2.18 ± 0.21) × 10 –8 m 2 V −1 s −1 ( N = 39), respectively. A protein electrophoresis model was applied and predicted that the differences in average mobilities could be explained through relatively minor changes in overall charge, Stokes radius, and shape. This difference was similar to the range in mobilities observed in the unlabelled protein. This is consistent with the electrophoretic heterogeneity of the unmodified enzyme being caused by relatively small differences in charge, size, and shape of the individual molecules in the population.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».