A qPCR assay for the detection of <i>Phytophthora abietivora</i> , an emerging pathogen on fir species cultivated as Christmas trees
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Emerging species of the Phytophthora genus are among the most important threats to global plant biodiversity. For instance, Phytophthora root rot (PRR) of Christmas trees is responsible for 10% of the observed mortality rate in nurseries. Diagnosis of PRR involves isolation followed by morphological and molecular identification of the causal agents. However, these methods are rarely adapted to larger scale experiments such as in situ detection. For these applications, molecular detection of environmental DNA (eDNA) provides the high-throughput and the fast result generation needed. Phytophthora abietivora was associated to PRR in firs cultivated as Christmas trees in the province of Québec (Canada). This study focused on developing a sensitive and specific qPCR assay targeting P. abietivora and validating its efficiency on eDNA samples. A set of primers and probe was designed for this assay, and parameters such as the limit of detection (LoD 95% ) and limit of quantification (LoQ) were measured. The assay was tested on eDNA obtained from healthy-looking and PRR symptomatic firs. The assay was shown to be semi-specific because it cross-reacted with P. abietivora, and four phylogenetically close species unrelated to fir diseases. The limit of detection (LOD 95% ) was estimated at 10 copies per reaction (C q of 35.7). The assay showed reliable detection down to 33 P. abietivora oospores per gram of soil. Out of 488 eDNA samples from soil, 68 tested positive for P. abietivora. While factors such as the tree species, the sampled region or the year of sampling did not affect the proportion of positive results, samples from trees showing PRR-like symptoms had significantly higher odds of testing positive compared to healthy-looking trees. This assay will be useful for rapid diagnostics of P. abietivora infected trees and as a prospecting tool to better characterize the natural distribution and dissemination of the disease.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».