Sphingolipids containing very long-chain fatty acids regulate Ypt7 function during the tethering stage of vacuole fusion
Notice bibliographique
Résumé
Sphingolipids are essential in membrane trafficking and cellular homeostasis. Here, we show that sphingolipids containing very long-chain fatty acids (VLCFAs) promote homotypic vacuolar fusion in Saccharomyces cerevisiae. The elongase Elo3 adds the last two carbons to VLCFAs that are incorporated into sphingolipids. Cells lacking Elo3 have fragmented vacuoles, which is also seen when WT cells are treated with the sphingolipid synthesis inhibitor Aureobasidin-A. Isolated elo3Δ vacuoles show acidification defects and increased membrane fluidity, and this correlates with deficient fusion. Fusion arrest occurs at the tethering stage as elo3Δ vacuoles fail to cluster efficiently in vitro. Unlike HOPS and fusogenic lipids, GFP-Ypt7 does not enrich at elo3Δ vertex microdomains, a hallmark of vacuole docking prior to fusion. Pulldown assays using bacterially expressed GST-Ypt7 showed that HOPS from elo3Δ vacuole extracts failed to bind GST-Ypt7 while HOPS from WT extracts interacted strongly with GST-Ypt7. Treatment of WT vacuoles with the fluidizing anesthetic dibucaine recapitulates the elo3Δ phenotype and shows increased membrane fluidity, mislocalized GFP-Ypt7, inhibited fusion, and attenuated acidification. Together these data suggest that sphingolipids contribute to Rab-mediated tethering and docking required for vacuole fusion.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».