Assessment of Real-Time PCR Techniques for the Detection of Airborne Fungal Pathogens of Wheat: Role of DNA Extraction on Spore Quantification
Notice bibliographique
Résumé
High Resolution Image Download MS PowerPoint Slide Our research focused on developing a highly sensitive whole-spore real-time immuno-PCR (RT-iPCR) assay for the detection of three wheat fungal pathogens: Pyrenophora tritici-repentis ( Ptr ), Fusarium graminearum ( Fg ), and Puccinia striiformis forma specialis (f. sp.) tritici ( Pst ). RT-iPCR measurements were compared to more well-established quantitative PCR (qPCR) assays to compare their performance. While specificity remained a challenge for RT-iPCR, the direct spore measurements negate the need for DNA extraction, making RT-iPCR a potentially valuable technique that warrants further research. An alternative approach was developed to determine DNA extraction efficiency and quantification of spore numbers by qPCR, which is currently a methodological gap in most qPCR spore measurements. DNA extraction efficiency determined for Fg, Pst, and Ptr spores were 5.0 ± 0.1, 7.0 ± 0.4, and 290 ± 36%, respectively, demonstrating important implications for the accuracy of these techniques when DNA recovery is not considered.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,009 | 0,008 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,001 |
| Communication savante | 0,002 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,002 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».