Quantification of morphological, functional, and biochemical features of H9c2 rat cardiomyoblast retinoic acid differentiation
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Cell culture models enable advancement in our understanding of heart development and heart disease. The H9c2 rat ventricular cardiomyoblast cell line can be differentiated, recapitulating certain components of cardiomyocyte development; however, morphological, functional, and biochemical changes are rarely investigated in parallel, thereby limiting fulsome understanding. We therefore characterized morphology, Ca 2+ handling, and gene expression after five days (5 days-in-vitro , DIV5), and fourteen days (DIV14) of exposure to differentiation stimuli, consisting of retinoic acid and low serum. We observed several morphological changes with increasing time in differentiation, including increased mean length, area, eccentricity, and multinucleation, as well as an increase in actin clusters. Spontaneous Ca 2+ transients in differentiated H9c2 cells had decreased frequency and synchronicity compared to those observed in primary cardiomyocytes. Additionally, key cardiomyocyte cytoskeletal proteins and ion channel transcript and protein expression levels changed significantly with differentiation, in alignment with changes normally observed in cardiomyocyte development. Our findings suggest H9c2 cells may be used as a high throughput screening model to investigate cardiomyocyte biology in certain developmental contexts with relevance to heart health and disease. Highlights We quantified morphology, Ca 2+ handling, and gene expression changes in rat ventricular cardiomyoblast H9c2 cells across retinoic acid differentiation. We compared multiple differentiation time points (mainly DIV0, DIV5, and DIV14) and observed time-dependent changes in all 3 aspects. We observed several morphological changes with increasing time in differentiation, including increased mean length, area, eccentricity, and multinucleation, as well as an increase in actin clusters. We observed the onset of spontaneous Ca 2+ transients with differentiation, with further changes in subpopulations with increasing time in differentiation. Finally, we observed multiple changes in gene expression consistent with cardiomyocyte differentiation. We summarize these parallel time-point dependent changes in morphology, Ca 2+ handing, and gene expression to enable other researchers to optimize their study design.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».