Studies of the FBT family transporters in Leishmania infantum by gene deletion and protein localization
Notice bibliographique
Résumé
The protozoan parasite Leishmania has a large family of major facilitator membrane proteins part of the Folate Biopterin Transporter (FBT) family. The chromosome 10 of Leishmania has a cluster of 7 FBT genes including the S-Adenosyl methionine (AdoMet) transporter and the functionally characterized folate transporters FT1 and FT5. Six of the 7 FBT proteins coded by this locus are located at the plasma membrane as determined by gene fusions with the green fluorescent protein. We deleted the whole locus of 7 genes (>30 kb) using CRISPR-Cas9 genome editing as a first step in studying the potential function of the four uncharacterized FBT genes from the locus. This knock out strain was viable, highly resistant to sinefungin (an AdoMet analogue) and to methotrexate (a folate analogue) but not to allopurinol, pentamidine or 5-fluorouracil. We similarly studied another FBT family member whose gene is encoded on chromosome 19. The protein was also located at the plasma membrane and its gene was dispensable for growth and not associated to any of the drug tested. Our work has indicated that large diploid deletion is achievable in Leishmania and the cell lines produced here will serve to better understand the function and putative substrates of these FBT proteins yet to be characterized. • The localization of 8 FBT proteins of the chromosomes 10 and 19 was studied. • All of the FBT proteins, except one, are located at the plasma membrane. • The whole cluster of 7 FBT genes was deleted in Leishmania. • The knock out strain was highly resistant to sinefungin and to methotrexate.
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Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
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score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».