Protocol for assessing the clogging of the mitochondrial translocase of the outer membrane by precursor proteins in human cells
Notice bibliographique
Résumé
Protein import into the mitochondria is required for organellar function. Inefficient import can result in the stalling of mitochondrial precursors inside the translocase of the outer membrane (TOM) and blockage of the mitochondrial entry gate. Here, we present a protocol to assess the clogging of TOM by mitochondrial precursors in human cell lines. We describe how the localization of mitochondrial precursors can be determined by cellular fractionation. We then show how co-immunoprecipitation can be used to test the stalling of precursors inside TOM. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Kim et al. 1 • Protocol to assess the stalling of mitochondrial precursors in TOM in human cell lines • Mitochondrial enrichment and protease protection assay determine precursor localization • Co-immunoprecipitation demonstrates precursor arrest inside TOM Publisher’s note: Undertaking any experimental protocol requires adherence to local institutional guidelines for laboratory safety and ethics. Protein import into the mitochondria is required for organellar function. Inefficient import can result in the stalling of mitochondrial precursors inside the translocase of the outer membrane (TOM) and blockage of the mitochondrial entry gate. Here, we present a protocol to assess the clogging of TOM by mitochondrial precursors in human cell lines. We describe how the localization of mitochondrial precursors can be determined by cellular fractionation. We then show how co-immunoprecipitation can be used to test the stalling of precursors inside TOM.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».