High-frequency regeneration and <i>Agrobacterium tumefaciens</i> -mediated transformation of broccoli ( <i>Brassica oleracea</i> var. <i>italica</i> )
Notice bibliographique
Résumé
Summary An efficient protocol for high frequency regeneration and Agrobacterium tumefacies mediated transformation of Broccoli ( Brassica oleracea var. italica ) has been developed. Hypocotyl and leaf segment explants were transferred on to MS medium supplemented with different concentrations and combinations of IAA (0-0.57 μM) and Kinetin/BAP/Zeatin (8.9-22.2 μM). Hypocotyl explants showed the highest regeneration potential. Maximum number of shoots (16 per explant) were obtained on MS medium supplemented with 0.57 μM IAA and 22.2 μM BAP. The concentrations of extracellular calcium, nitrate and ammonium nitrogen in the medium had a marked effect on regeneration. The optimal media for maximum shoot proliferation (30 per explant) contained 3 mM CaCl 2 , 1900 mg l -1 KN0 3 , 825 mg l -1 (NH 4 ) 2 S0 4 , 22.2 μM BAP and 0.57 μM IAA. Rhizogenesis from isolated shoots was obtained on B5 medium supplemented with 2.85 μM IAA. The high frequency regeneration system served as an excellent tool to establish an efficient transformation method of broccoli. Hypocotyl explants were co-cultivated with the Agrobacterium tumefaciens strain LBA 4404, containing a binary vector with the neomycin phosphotransferase ( nptii ) gene and a β-glucuronidase ( gus ) gene, each under the control of a separate CaMV35S promoter. Primary selection of transformed explants was performed on high kanamycin (100 mg l -1 ) containing medium for 10 days and regeneration was achieved on the optimised regeneration medium containing lower concentration (50 mg l -1 ) of kanamycin. The frequency of transgenic plants was calculated on the basis of GUS activity detected by histochemical X-gluc test. The effect of pre-culture and growth of bacterial culture was studied. Explants precultured for 2-days prior to inoculation with A. tumefaciens resulted in improved transformation frequency. Bacterial cultures grown to the optical density of 2.0 resulted in the highest transformation rate (60%). Evidence for integration of nptii gene was obtained by the PCR. All transgenic plants grew normally. The present study demonstrates the improved high frequency regeneration and transformation of B. oleracea var. italica .
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».