Abstract 5201: Modeling human mammary epithelial lineages using patient-derived organoid cultures
Notice bibliographique
Résumé
Abstract Organoids have emerged as a powerful model for studying normal and tumor cell biology; however, the application of organoid technology for culturing human breast epithelial cells has been challenging due to the difficulty in maintaining estrogen receptor (ER)-expressing cells in culture. To address this problem, we have developed MammoCult™ Organoid Kit (Human), a modular serum- and phenol red-free cell culture kit that promotes the growth of multilineage organoids, as well as organoids composed solely of ER+ and ER- luminal or basal cells. Primary human breast cells from reduction mammoplasty tissues from both pre- and postmenopausal donors were dissociated and seeded in 3D extracellular matrix domes, as either single cells or tissue fragments. Organoids were typically dissociated and passaged every 10 - 20 days. Cultures were analyzed by flow cytometry and immunocytochemistry for the expression of the pan epithelial marker EpCAM, the luminal markers Keratin 8 (K8), KIT, ER, MUC1, progesterone receptor (PR), and the basal markers CD49f, smooth muscle actin (SMA), and K14. Organoid cultures initiated from single cell suspensions generated distinct organoid morphologies reflective of their cell of origin. Luminal cells generated small hollow cystic organoids composed predominantly of cells that expressed K8, MUC1, and variable levels of expression of ER, PR, and KIT (n = 6 - 12). Notably, ER expression was maintained in luminal organoids for a minimum of 5 passages when split at a 1:3 to 1:5 split ratio (n = 3). Basal cells seeded in Corning® Matrigel® supplemented with collagen I (2 mg/mL) formed terminal ductal lobular unit (TDLU)-like branching structures that were composed solely of K14+SMA+ basal cells and could be passaged for a minimum of 2 passages when co-seeded with human mammary fibroblasts (n = 3). Multilineage organoids composed of both luminal and basal cells could be generated when cell aggregates or tissue fragments were initially seeded (n = 5). These results demonstrate that the MammoCult™ Organoid Kit (Human) offers a robust, in vitro model system for studying human mammary gland biology. Citation Format: David A. Rowbotham, Samantha Rothwell, Sharon A. Louis, Allen C. Eaves, John Stingl. Modeling human mammary epithelial lineages using patient-derived organoid cultures [abstract]. In: Proceedings of the American Association for Cancer Research Annual Meeting 2025; Part 1 (Regular Abstracts); 2025 Apr 25-30; Chicago, IL. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2025;85(8_Suppl_1):Abstract nr 5201.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,002 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».