Increasing Aptamer Affinity from Millimolar to Nanomolar by Forming a Covalent Adduct for Detecting Acrylamide
Notice bibliographique
Résumé
Being a neurotoxin and carcinogen, acrylamide has been an important target for developing biosensors. DNA aptamers are attractive for making biosensors due to their programmable structure, low cost, and ease of modification. However, DNA aptamers have poor affinities to low-binding epitope target molecules such as acrylamide. In this work, an aptamer for acrylamide was isolated with an apparent K d of 10.5 mM using a thioflavin T fluorescence assay and 4.7 mM using the fluorescence strand-displacement assay. To improve binding affinity, acrylamide was reacted with xanthydrol to form a covalent adduct, and a new aptamer selected for this adduct achieved a K d of 20 nM using the strand-displacement assay, representing an improvement of 235,000-fold. Using the strand-displacement biosensor, a limit of detection of 4.2 nM was achieved for the adduct. This work demonstrates a practical route to convert low epitope targets to high-affinity targets for aptamer binding and bioanalytical applications.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,002 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».