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Enregistrement W4410135650 · doi:10.21769/bioprotoc.5295

A Guide to Basic RNA Sequencing Data Processing and Transcriptomic Analysis

2025· article· en· W4410135650 sur OpenAlexaff
Rowayna Shouib, Gary Eitzen, Rineke Steenbergen

Notice bibliographique

RevueBIO-PROTOCOL · 2025
Typearticle
Langueen
DomaineBiochemistry, Genetics and Molecular Biology
ThématiqueCancer-related molecular mechanisms research
Établissements canadiensUniversity of Alberta
Organismes subventionnairesnon disponible
Mots-clésTranscriptomeRNA-SeqComputational biologyComputer scienceRna processingRNABiologyGeneticsGene expressionGene

Résumé

récupéré en direct d'OpenAlex

RNA sequencing (RNA-Seq) has transformed transcriptomic research, enabling researchers to perform large-scale inspection of mRNA levels in living cells. With the growing applicability of this technique to many scientific investigations, the analysis of next-generation sequencing (NGS) data becomes an important yet challenging task, especially for researchers without a bioinformatics background. This protocol offers a beginner-friendly step-by-step guide to analyze NGS data (starting from raw .fastq files), providing the required codes with an explanation of the different steps and software used. We outline a computational workflow that includes quality control, trimming of reads, read alignment to the genome, and gene quantification, ultimately enabling researchers to identify differentially expressed genes and gain insights on mRNA levels. Multiple approaches to visualize this data using statistical and graphical tools in R are also described, allowing the generation of heatmaps and volcano plots to represent genes and gene sets of interest. Key features • Provides a beginner-friendly protocol for RNA-Seq analysis to obtain insights into gene expression. • Pipeline starts with raw .fastq files and involves analysis in command line/terminal and R (via RStudio). • Yields a variety of output files that represent mRNA levels amongst different samples. Output files include count files, heatmaps, ordered lists of DEGs, and volcano plots.

Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.

Comment cette classification a été obtenuedéplier

Prédiction machine sur la base complète

Imitation des enseignants

Ni prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.

score de la tête « metaresearch » (Codex)0,005
score de la tête « metaresearch » (Gemma)0,008
Version: metacan-v3-hybrid-931329e0061cStatut de validation: machine_predicted_unvalidated
Catégories candidatesaucune
Catégories consensuellesaucune
DomaineSignal candidat: aucune · Signal consensuel: aucune
Devis d'étudeSignal candidat: Sans objet · Signal consensuel: Sans objet
GenreSignal candidat: Méthodes · Signal consensuel: Méthodes
Score de désaccord entre enseignants0,161
Score d'incertitude au seuil0,539

Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)

CatégorieCodexGemma
Métarecherche0,0050,008
Méta-épidémiologie (sens strict)0,0030,004
Méta-épidémiologie (sens large)0,0020,002
Bibliométrie0,0040,003
Études des sciences et des technologies0,0020,001
Communication savante0,0030,002
Science ouverte0,0040,002
Intégrité de la recherche0,0020,006
Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger)0,1610,190

Scores machine (provisoires)

Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.

Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.

Tête enseignante Opus0,030
Tête enseignante GPT0,382
Écart entre enseignants0,352 · la distance entre les deux têtes enseignantes sur ce seul travail
Statut de validationscore_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle

Classification

machine, non validée

Prédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.

Les modèles n’ont appliqué aucune catégorie : rien dans la taxonomie ne correspondait à ce travail.
Devis d'étudeSans objet
Domainenon disponible
GenreMéthodes

Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».

En bref

Citations4
Publié2025
Routes d'admission1
Résumé présentoui

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