Chalcone isomerase-like (CHIL) impedes the lactone shunt and modulates flux partitioning in isoflavonoid biosynthesis
Notice bibliographique
Résumé
ABSTRACT The reconstitution of biosynthetic pathways in heterologous hosts is often challenged by the transition to a foreign cellular environment, lacking compatible structural or regulatory features. Auxiliary or non-catalytic proteins can play a critical role in guiding metabolic flux. Chalcone isomerase-like (CHIL) is a non-catalytic protein known to serve as a partner to chalcone synthase (CHS) in flavonoid biosynthesis, rectifying its promiscuous activity and preventing the formation of by-products, such as p -coumaroyltriacetic acid lactone (CTAL). Here, we extended the functional analysis of CHILs to the legume-characteristic isoflavonoid pathway. We assessed CHIL orthologs, using sequence analysis and structural modelling to predict their respective binding capacities, followed by in vitro characterization. The addition of CHIL to enzyme assays containing CHS, alone or with downstream enzymes, chalcone reductase (CHR) and chalcone isomerase (CHI), reduced CTAL levels (up to 42%) while simultaneously increasing the output of desired intermediates. Combinatorial yeast biotransformation assays described a critical role for CHIL in conducting flux through chalcone, flavanone, and isoflavone biosynthesis. The inclusion of CHIL in engineered yeast strains enhanced overall titers and, unexpectedly, promoted partitioning toward the deoxy-branch (isoliquiritigenin, liquiritigenin, and daidzein) up to 67%, with a 33% increase in final daidzein titers. Therefore, we have revealed an expanded role for CHIL as an auxiliary protein in isoflavonoid biosynthesis and underscored the utility of non-catalytic proteins in metabolic engineering.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».