ATAC-seq of Low-Input and Cryopreserved Primordial Germ Cells Reveals Functional Enhancers
Notice bibliographique
Résumé
Dynamic changes in chromatin accessibility at cis-regulatory elements underlie cell fate transitions during development. Primordial germ cells (PGCs) represent a rare population whose chromatin dynamics remain poorly understood compared to known epigenetic landscapes. Here, we utilized the chicken PGC model to bridge this gap, leveraging its capacity for in vitro expansion and in vivo colonization. We adapted the ATAC-seq workflow to obtain reproducible accessible chromatin region (ACR) profiles from as few as 200 cells, even after cryopreservation. Integrative analysis identified over 10,000 PGC-specific ACRs, many absent from somatic tissues, and revealed inherent Tn5 transposase sequence biases in the chicken genome. To validate these ACRs, we established an in vitro PGC differentiation system and utilized in vivo embryonic transplantation. Reporter assays confirmed enhancer activities in cultured PGCs, while transcriptome integration associated these ACRs with genes expressed at embryonic day 2.5. In vivo transplantation demonstrated that these enhancers exhibited early stage-specific activity, becoming silenced upon gonadal settlement. Our results provide a practical strategy for identifying functional regulatory elements from minimal starting material, facilitating the study of chromatin dynamics in rare cell populations.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».