Abstract Thu035: Growth Factor-Based Manufacturing of Human Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes Using the Vertical Wheel Bioreactor System
Notice bibliographique
Résumé
Background: Although several methods have been reported for the large-scale generation of hPSC-derived cardiomyocytes (hPSC-CMs) in bioreactors exclusively using small molecules, no comparable bioreactor-based protocol has been established using growth factors, despite evidence that differentiation with optimized concentrations of BMP4, Activin A, and bFGF offers finer control of cardiomyocyte phenotype. Here, we develop scalable hPSC expansion and growth factor based cardiac differentiation protocols using the Vertical Wheel Bioreactor (VWBR) system. Methods and Results: The expansion of undifferentiated hPSCs in VWBRs was optimized by varying parameters including cell inoculation density, agitation rate, and media exchange schedule. Next, we examined the impact that different hPSC culture conditions had on subsequent cardiac differentiation potential. Notably, hPSCs expanded at different densities and agitation rates all yielded high purity hPSC-CMs when differentiated in either 6-well plates or VWBRs. However, hPSCs initially expanded in VWBRs showed significantly lower cardiomyocyte yields than hPSCs expanded in 2D culture. Examination of differentiation kinetics revealed that 3D expanded hPSCs exhibited accelerated mesoderm commitment relative to their 2D counterparts, as well as a significant fraction of endoderm contamination by as early as day 3 of differentiation. Modification of our aggregation and mesoderm induction steps greatly improved cardiogenesis and enabled reliable production of >1x10 6 /mL cardiac troponin T + (cTnT) hPSC-CMs expressing MLC2v. Highlighting the versatility of our protocol, simple changes in the BMP4:Activin A ratio enabled second heart field-based differentiation and production of atrial-like cardiomyocytes in VWBRs. Lastly, we show that our developed expansion and differentiation protocols were reproducible and economic in 500mL VWBRs, enabling the production of 1.1x10 6 hPSC-CMs/mL at a mean purity of 93% cTnT + . Conclusions: This novel bioreactor-based protocol will enable cardiac cell therapy and tissue engineering applications by providing scalable and consistent production of hPSC-derived cardiac cell products.
Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.
Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».