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Enregistrement W4416423125 · doi:10.17504/protocols.io.36wgqp8q5vk5/v1

A Quantitative Determination of Dielectric Thresholds for DNA Precipitation by Ethanol v1

2025· article· W4416423125 sur OpenAlexaff
Agam Vohra

Notice bibliographique

Revuenon disponible
Typearticle
Langue
DomaineBiochemistry, Genetics and Molecular Biology
ThématiqueDNA Repair Mechanisms
Établissements canadiensPrincess Margaret Cancer Centre
Organismes subventionnairesnon disponible
Mots-clésPrecipitationDielectricEthanol precipitationEthanolAnalytical Chemistry (journal)AbsorbanceReagent

Résumé

récupéré en direct d'OpenAlex

Current DNA preservation practices rely on empirically determined volumetric rules rather than quantitative theoretical frameworks. Existing models overestimate ethanol requirements, limiting reproducibility and hindering the development of efficient protocols. A dielectric threshold–based model for predicting ethanol volumes during DNA precipitation establishes a framework that will reduce reagent waste and thus, environmental impact. This quantitative framework predicts the minimum ethanol requirement for human somatic DNA precipitation as a function of DNA molarity, derived from spectrophotometric absorbance data using the Beer-Lambert Law and Coulomb’s Law. For four different DNA conditions, 12 replicate samples were prepared across an ethanol concentration gradient from 54% to 90% v/v in 2% increments (n = 12 per concentration). DNA molarity and the dielectric constants of ethanol (ε = 24.5) and water (ε = 80.1) were used to calculate the dielectric constant of each solution, enabling determination of the threshold for DNA precipitation. DNA precipitation begins at 58-60% ethanol and reaches a maximum yield of 95% at 72% ethanol. Across all four DNA concentrations (2, 5, 8, and 10 ng/µL), replicates demonstrated consistent dielectric thresholds and precipitation profiles, generating a reproducible sigmoidal recovery curve. ε = 40.07 is the dielectric threshold at which DNA precipitates optimally, corresponding to the point at which our yield plateaus (varying ± 3% across replicates). These results validate the dielectric-threshold framework, showing a slight shift in the onset relative to theoretical predictions, while demonstrating that ethanol volumes can be optimized without compromising DNA integrity. Adopting the dielectric-threshold framework reduces ethanol requirements by 3% compared to standard DNA precipitation protocols, while ensuring optimal yield and quality. Standardizing this model will improve reproducibility, enable automation, and reduce biohazardous and flammable waste across high-throughput workflows.

Récupéré en direct depuis OpenAlex et désinversé. Les résumés ne sont pas conservés dans cette base de données : les index inversés représentent 8,6 Go des 9,3 Go de texte de la base, et le serveur dispose de 13 Go libres.

Comment cette classification a été obtenuedéplier

Prédiction machine sur la base complète

Imitation des enseignants

Ni prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.

score de la tête « metaresearch » (Codex)0,001
score de la tête « metaresearch » (Gemma)0,004
Version: metacan-v3-hybrid-931329e0061cStatut de validation: machine_predicted_unvalidated
Catégories candidatesaucune
Catégories consensuellesaucune
DomaineSignal candidat: aucune · Signal consensuel: aucune
Devis d'étudeSignal candidat: Expérimental (laboratoire) · Signal consensuel: Expérimental (laboratoire)
GenreSignal candidat: Empirique · Signal consensuel: aucune
Score de désaccord entre enseignants0,002
Score d'incertitude au seuil0,007

Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)

CatégorieCodexGemma
Métarecherche0,0010,004
Méta-épidémiologie (sens strict)0,0010,001
Méta-épidémiologie (sens large)0,0010,001
Bibliométrie0,0010,001
Études des sciences et des technologies0,0000,001
Communication savante0,0010,001
Science ouverte0,0010,001
Intégrité de la recherche0,0010,001
Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger)0,0010,001

Scores machine (provisoires)

Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.

Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.

Tête enseignante Opus0,012
Tête enseignante GPT0,298
Écart entre enseignants0,286 · la distance entre les deux têtes enseignantes sur ce seul travail
Statut de validationscore_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découle

Classification

machine, non validée

Prédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.

Les modèles n’ont appliqué aucune catégorie : rien dans la taxonomie ne correspondait à ce travail.
Devis d'étudeExpérimental (laboratoire)
Domainenon disponible
GenreEmpirique

Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».

En bref

Citations0
Publié2025
Routes d'admission1
Résumé présentoui

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