A High-affinity but Low-abundance Kanamycin Aptamer Reveals Hybridization-limited Capture-SELEX
Notice bibliographique
Résumé
Kanamycin A, or simply referred to as kanamycin, is an aminoglycoside antibiotic with a narrow therapeutic window. Aptamers are useful recognition molecules for its detection and continuous monitoring. However, a high-quality kanamycin aptamer that works under physiological condition is still lacking. In this work, we revisited a previous aptamer selection done at pH 8, which was abandoned due to poor sequence enrichment. Its top sequence named KAN8-1 shows a Kd of 51 nM at pH 7.5 for kanamycin as measured by isothermal titration calorimetry, and its affinities to kanamycin A and B are similar. Using NMR spectroscopy methods, the KAN8-1 aptamer undergoes ligand-induced folding and likely has a better defined structure compared to the KAN6-1 aptamer, which was highly enriched at the pH 6 selection. Using the KAN8-1 aptamer, a strand-displacement biosensor was developed and it has a limit of detection of 0.9 µM with excellent selectivity. This sensor also has a similar performance in serum. The reason for the poor enrichment of KAN8-1 was attributed to its low hybridization efficiency and poor hybridization stability to the capture strand as demonstrated by a fluorescence titration assay and melting analysis, which indicated a limitation of the capture-SELEX method.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,001 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,001 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».