Reference Gene Selection for Accurate RT-qPCR Normalization in Four Tissues and Whole-Body Samples of <i>Acheta domesticus</i>
Notice bibliographique
Résumé
House crickets (Acheta domesticus) are increasingly recognized as a sustainable protein source for food and feed systems. However, despite their growing relevance, molecular research on this species remains extremely limited, particularly concerning robust normalization strategies for gene expression analysis. This study is the first to identify and validate suitable reference genes for RT-qPCR analysis in A. domesticus across different tissues, an essential step for accurate quantification of host and pathogen target gene expression. Six candidate reference genes commonly used in insects (AdoNEOPT, EF2, 18S rRNA, EF1α, Histone H3, and GAPDH) were evaluated for expression stability in five tissue types (abdomen, legs, wings, head, and whole body). Gene stability was assessed using five computational tools: BestKeeper, geNorm, NormFinder, Delta Ct, and the integrated platform RefFinder. Additional validation was performed using the R statistical software. The results revealed tissue-specific variation in the ranking of reference genes across different algorithms. However, despite these differences in ranking, several candidate genes consistently met established stability criteria, indicating stable expression across tissues. In particular, EF1α, AdoNEOPT, EF2, and 18SrRNA demonstrated reliable stability, whereas GAPDH and HisH3 showed higher variability and were generally unsuitable, except for GAPDH in head tissue. Our data show that differences in gene ranking across tissues and analytical methods reflect biological and methodological variability rather than true instability. This study provides the first validated set of reference genes for A. domesticus, supporting accurate gene expression analysis and the development of reliable RT-qPCR-based diagnostic tools for improved health monitoring and biosafety in insect farming.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction distillée sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Apprise à partir de 10 348 étiquettes directes de Codex et de 10 348 étiquettes directes de Gemma. Le mode candidate est l'union des têtes enseignantes seuillées; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont ni des étiquettes humaines ni des étiquettes directes de modèles de pointe.
Scores Codex et Gemma par catégorie
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,000 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,000 | 0,000 |
| Études des sciences et des technologies | 0,000 | 0,000 |
| Communication savante | 0,000 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,000 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,000 | 0,000 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,000 | 0,000 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule tête enseignante, pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».