Spectrophotometric Analysis of Human CY P2El -Catalyzed pNitrophenol Hydroxylation
Notice bibliographique
Résumé
CYP2E1 is expressed in adult ( 1 , 2 ) and fetal ( 3 ) human liver in addition to extrahepatic tissues such as lung and placenta ( 4 ). Treatment of primary cultures of human hepatocytes with ethanol induces CYP2E1 protein ( 5 ) and this is consistent with the finding that hepatic CYP2El protein ( 6 ) and mRNA ( 7 ) amounts are increased in alcoholics. Although only a few drugs (e.g., acetaminophen [ 8 ]) have been identified as substrates for CYP2E1, many low molecular weight procarcinogens are activated by this P450 ( 9 ). Chlorzoxazone 6-hydroxylation ( 19 – 12 ), N-nitrosodimethylamine N-demethylation ( 11 , 13 , 14 ), and p-nitrophenol hydroxylation ( 12 , 14 ) reactions can be used to measure the catalytic activity of cDNA-expressed CYP2El. Each of these activities is also frequently used as an enzyme-selective catalytic monitor for human hepatic CYP2El ( see Notes 1 and 2 ). Experiments with inhibitory antiCYP2E1 antibodies and CYP2E1-selective chemical inhibitors suggest that CYP2E1 contributes extensively to these activities in human liver microsomes ( 9 , 15 – 18 ). Recently, lauric acid 11 -hydroxylation was identified as an alternative probe for human hepatic CY2El ( 19 ). However, an advantage of using p-nitrophenol hydroxylation to measure CYP2E1 activity is that the formation of p-nitrocatechol can be measured by a simple spectrophotometric assay, although high-performance liquid chromatographic (HPLC) assays have also been developed to quantify thep-nitrocatechol metabolite ( 20 , 21 ). This chapter describes a modification of a spectrophotometric method ( 22 ) for the determination of p-nitrophenol hydroxylase activity. These keywords were added by machine and not by the authors. This process is experimental and the keywords may be updated as the learning algorithm improves.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,001 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,002 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,000 | 0,000 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,000 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,001 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,002 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,003 | 0,002 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».