The rapid decline of MTT reduction is not a marker of death signaling in ouabain-treated cells.
Notice bibliographique
Résumé
Decreased staining with dimethylthiazol diphenyltetrazolium (MTT) is widely used for cell death detection. This study examined MTT assay as a marker of the Na+i,K+i-independent mode of cell death revealed in ouabain-treated C7-MDCK cells derived from distal tubule of the Madin-Darby canine kidney. The action of 3-M ouabain on MTT reduction in C7-MDCK cells exhibited bipartite kinetics with a rapid ~2-fold decline occurring in 30-120 min and a delayed ~8-10-fold decrease after 10 hr of ouabain addition. Treatment with ouabain for 18 hr led to 6-fold activation of caspase-3, 4-fold elevation of chromatin fragmentation, and massive cell detachment. Caspase-3 activation, chromatin fragmentation and cell detachment were completely abolished by acidification of the incubation medium from pH 7.2 to 6.7. In contrast, the 2-fold inhibition of MTT reduction seen in 5 hr of ouabain addition was not affected by medium acidification. Within the 5-hr time window, we did not observe any significant impact of ouabain on the cellular redox state estimated by the autofluorescence ratio of reduced pyridine nucleotides and oxidized flavoproteins. In rat aortic endothelial cells and primary astrocytes, exposure to 5-mM ouabain attenuated MTT reduction but did not affect cell survival. Thus, our results show that diminished staining with MTT in ouabain-treated cells is not sufficient proof of triggering of the cell death machinery. We speculate that altered endo- and exocytoses evoked by cardiotonic steroids contribute to decreased MTT reduction.
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Comment cette classification a été obtenuedéplier
Prédiction machine sur la base complète
Imitation des enseignantsNi prévalence calibrée, ni vérité terrain. Validation humaine à venir. Le volet Gemma est une étiquette directe du modèle pour chaque travail de la base, lue sur la notice réduite au titre. Le volet Codex est un classifieur appris des 10 348 étiquettes directes de Codex et calibré sur les taux pondérés de l'échantillon; les champs sans appui suffisant ne portent aucun appel Codex. Le mode candidate est l'union des deux volets; le consensus est leur intersection. Ces sorties portent le statut machine_predicted_unvalidated et ne sont pas des étiquettes humaines.
Scores du classifieur distillé par catégorie (deux têtes)
| Catégorie | Codex | Gemma |
|---|---|---|
| Métarecherche | 0,000 | 0,001 |
| Méta-épidémiologie (sens strict) | 0,001 | 0,000 |
| Méta-épidémiologie (sens large) | 0,001 | 0,001 |
| Bibliométrie | 0,001 | 0,001 |
| Études des sciences et des technologies | 0,001 | 0,000 |
| Communication savante | 0,001 | 0,001 |
| Science ouverte | 0,001 | 0,000 |
| Intégrité de la recherche | 0,001 | 0,002 |
| Charge utile insuffisante (le modèle a refusé de juger) | 0,003 | 0,001 |
Scores machine (provisoires)
Les deux têtes enseignantes du modèle étudiant, lues sur ce travail. Un score ordonne la base pour la relecture; il n'affirme jamais une catégorie, et le statut de validation accompagne chaque rangée tel quel.
Scores de référence d'un modèle non mature (critères de maturité non atteints, 7 itérations). Un score ordonne; il n'affirme jamais une catégorie.
score_only:v0-immature-baseline · tel quel depuis la passe de notation : score_only signifie que le nombre peut ordonner les travaux, et qu'aucune étiquette de catégorie n'en découleClassification
machine, non validéePrédiction automatique; un appel candidat d’une seule source (Gemma direct ou Codex distillé), pas un consensus.
Le détail, modèle par modèle et score par score, se trouve en fin de page sous « Comment cette classification a été obtenue ».